具有绿色荧光蛋白的人偏肺病毒 （MPV-GFP1）

产品简介：人偏肺病毒 （MPV） 是副粘病毒科肺病毒亚家族中的一种阴性单链 RNA 病毒，与禽偏肺病毒 （AMPV） 亚群 C 密切相关。迄今为止，已经确定了 MPV 的两个主要亚型（A 和 B）和4个亚型。该病毒在世界范围内分布，在冬季具有季节性分布。MPV是小儿下呼吸道疾病的第二大常见原因，仅次于RSV。人类偏肺病毒感染往往发生在年龄稍大的儿童中，并产生不太严重的疾病。然而，幼儿、老人和免疫功能低下的人有患严重疾病和住院治疗的风险。到五岁时，几乎所有儿童都接触过该病毒，再次感染很常见。MPV 的基因组组织类似于 RSV，但 MPV 缺乏非结构基因 NS1 和 NS2。

毒株构建方法：抗基因组 pHMPV83 质粒通过启动子-近端插入含有用于增强绿色荧光蛋白 （GFP） 的 ORF 的转录盒 （Clonetech） 进行修饰。GFP ORF 两侧是源自 F 基因的 16-nt 推定 N 基因起始 （GS） 序列和 14-nt 推定基因末端 （GE） 序列，然后是与 N-P 基因连接相同的 2-nt （GT） 基因间区域和完整的 N 基因，导致最终构建的 pHMPV–GFP（图）。将抗基因组质粒 pHMPV-GFP 转染到 BSR T7/5 细胞中，该细胞稳定表达 T7 RNA 聚合酶，以及编码 N、P、L 和 M2-1 蛋白的支持质粒。在 5 ug/ml 胰蛋白酶存在下，将回收的病毒与 LLC-MK2 细胞进一步传代。MPV-GFP1 的复制效率与其生物衍生的对应物相似。