具有绿色荧光蛋白的人呼吸道合胞病毒亚型 B （RSVB-GFP3）

产品简介： 人类呼吸道合胞病毒 （RSV） 是婴幼儿严重呼吸道感染的最常见病原体。RSV 是一种有包膜的、非分段的、负义的、单链的 RNA 病毒，由大约 15,000 个核苷酸组成，被归类为肺病毒科的正肺病毒属。RSV感染经常在冬季季节性爆发期间观察到。该病毒通常引起自限性上呼吸道 （URT） 感染，但在少数病例中，可能会发生严重的下呼吸道 （LRT） 感染，导致肺炎或细支气管炎。目前的治疗选择有限，目前没有RSV疫苗获得许可。根据附着 G 蛋白的抗原差异，已经确定了两个主要亚型（A 和 B）。这两个亚组在每年流行期间共同循环，或在每年流行之间交替传播，并引起难以区分的疾病。亚组之间和亚组内的抗原变异可能通过逃避宿主免疫反应而导致这些病毒的再感染。

毒株构建方法： 大多数可用于 RSV 的信息和试剂都针对亚组 A。在这里，使用反向遗传学系统创建了表达绿色荧光蛋白 （GFP） 的具有复制能力的重组 RSV 亚群 B 菌株。病毒骨架来源于抗原亚群B的野生型RSV株B1（GenBank：AF013254.1）。编码增强绿色荧光蛋白的 GFP 基因作为附加基因插入 NS2 和 N 基因之间（在第 3 个基因位置）。由于野生型G基因的序列难以在大肠杆菌中克隆成全长反基因组cDNA，因此掺入了G基因的密码子优化版本。由此产生的病毒在细胞培养物中复制为野生型滴度，并在感染细胞中有效表达GFP。