EcoRI-HF 限制性内切酶

产品信息

高保真（HF）限制性内切酶在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性；统一缓冲液意味着更加直接、简化的样品处理过程。HF 内切酶还会进一步降低星号活性。所有 HF 内切酶均符合省时酶（Time-Saver）标准，可在 5-15 分钟内酶切底物 DNA，也可实现过夜酶切而不会造成 DNA 降解。HF 限制性内切酶在改造时便将性能作为重要指标，可在更宽的条件范围下具有完全活性，更大限度地减少非特异性酶切产物，同时为实验设计提供灵活性。

产品特点

·   为提高性能进行基因工程改造

·   在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性

·   符合省时酶（Time-Saver）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切

·   降低星号活性

·   随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料

·   限制性内切酶酶切位点：G/AATTC

NEB 各常规和高保真（HF）限制性内切酶均经过严格的质量控制。部分 HF 限制性内切酶的 核酸酶污染研究如下所示。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自大肠杆菌（E. coli）RY13（R.N. Yoshimori）并经修饰的 EcoRI 基因

产品组分信息

本产品提供以下试剂或组分：

特性和用法

1）单位定义：一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 µg pBR322 DNA（dam 甲基化）所需的酶量。

2）反应条件：

·   1X rCutSmart 缓冲液
·   Incubate at 37°C

·   1X rCutSmart 缓冲液
·   50 mM Potassium Acetate
·   20 mM Tris-acetate
·   10 mM Magnesium Acetate
·   100 µg/ml Recombinant Albumin（pH 7.9   25°C）

3）在不同缓冲液中的活性：

·   NEBuffer r1.1: 100%
·   NEBuffer r2.1: 100%
·   NEBuffer r3.1: 75%
·   rCutSmart 缓冲液: 100%

4）稀释兼容性：稀释液 C

5）贮存溶液：

·   10 mM Tris-HCl
·   300 mM NaCl
·   1 mM DTT
·   0.1 mM EDTA
·   500 µg/ml Recombinant Albumin
·   50% Glycerol（pH 7.4   25°C）

6）热失活：80°C for 20 minutes

7）甲基化敏感性：

·   dam 甲基化: Not Sensitive
·   dcm 甲基化: Not Sensitive

·   CpG甲基化: Blocked by Some Combinations of Overlapping

!!! 注意事项

EcoRI-HF 与 EcoRI（NEB #R0101）具有相同的特异性，但经过改造后星号活性显著降低。某些 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切。